Karen Lujean Nyberg nasceu a 7 de Outubro de 1969 em Parkers Prairie, Minnesota, no entanto considera Vining, Minnesota, como a sua cidade natal.
Karen Nyberg terminou o ensino secundário em 1988 na Escola Pública de Henning, Henning – Minnesota, tendo posteriormente recebido o seu bacharelato em Engenharia Mecânica pela Universidade do Dakota do Norte em 1994. Mais tarde, completou o mestrado em Engenharia Mecânica pela Universidade do Texas, Austin (1996), e o doutoramento na mesma área também pela Universidade do Texas em 1998.
A sua investigação de formação foi levada a cabo no Austin BioHeat Transfer Laboratory, onde investigou a termorregulação humana e o teste metabólico experimental especificamente relacionado com o controlo da neutralidade térmica nos fatos espaciais. Entre 1991 e 1995 trabalhou no Centro Espacial Johnson, Houston – Texas, em várias áreas. Em 1998, Karen aceitou uma posição na Crew and Thermal Systems Division, trabalhando como engenheira de sistema de controlo ambiental. O seu primeiro trabalho esteve relacionado com o desenvolvimento de melhores sistemas de controlo térmico e avaliação de tecnologias de arrefecimento anti incêndios.
Participou no desenvolvimento do sistema de ventilação para o módulo TransHab; dos sistemas de suporte de vida e sistema de monitorização de parâmetros ambientais do veículo X-38; e dos sistemas de monitorização de temperatura e de controlo para as estações automáticas de Marte, bem como das câmaras hiperbáricas colapsáveis.
A 26 de Julho de 2000 Karen Nyberg foi seleccionada pela NASA como candidata a astronauta (Grupo 18) para treinos como Especialista de Missão. Frequentou o curso de treino geral e quando terminou o seu treino foi qualificada como Especialista de Missão e destacada para o ramo de operações do Corpo de Astronautas.
A 24 de Março de 2007 foi anunciado que Karen Nyberg havia sido seleccionada como Especialista de Missão para a missão STS-124 cujos objectivos eram o transporte de um módulo pressurizado e do sistema de manipulação remota para o módulo japonês Kibo da estação espacial internacional.
O seu primeiro voo espacial teve lugar entre 31 de Maio e 14 de Junho de 2008 a bordo do vaivém espacial OV-103 Discovery. Esta missão teve a duração de 13 dias 18 horas 13 minutos e 5 segundos. Karen Nyberg tornou-se no 301.º astronauta dos Estados Unidos (juntamente com Gregory Errol Chamitoff, Ronald John Garan e Kenneth Toff Ham) e no 475.º ser humano (juntamente com Gregory Errol Chamitoff, Ronald John Garan, Kenneth Toff Ham e Akhihiko Hoshide) a realizar um voo espacial orbital.
A 6 de Maio de 2009 foi anunciado que Karen Nyberg havia sido seleccionada como Especialista de Missão para o voo STS-132. Porém, a 11 de Agosto de 2009, e devido a problemas médicos, seria substituída pelo astronauta Michael Good.
A 5 de Dezembro de 2010 foi anunciado de Karen Nyberg havia sido seleccionada como Engenheira de Voo para a tripulação da Expedição 36/37 a bordo da estação espacial internacional. Na mesma altura esta tripulação (Maksim Suraev e Luca Parmitano) seria suplente da Soyuz TMA-07M. A 18 de Fevereiro de 2011 a nomeação foi confirmada pela NASA.
A 18 de Agosto participou em treinos aquáticos no Centro de Treino do Ministério de Emergências na vizinhança de Noginsk (juntamente com Suraev e Parmitano).
A 27 e 28 de Novembro levou a cabo com sucesso os exames de treino no simulador do segmento russo da ISS e no simulador da Soyuz TMA juntamente com Fyodor Yurchikhin e Luca Parmitano. A 29 de Novembro era aprovado como Engenheiro de Voo da tripulação suplente da Soyuz TMA-07M, decisão esta que foi confirmada a 18 de Dezembro.
A missão Soyuz TMA-09M foi a segunda missão espacial orbital de Karen Nyberg que assim se tornou no 233.º astronauta dos Estados Unidos e no 332.º ser humano a realizar duas missões espaciais orbitais.