Os astronautas Rick Mastracchio e Mike Hopkins realizaram uma segunda actividade extraveícular a 25 de Dezembro de 2013 (EUA EVA-25) para terminar os trabalhos iniciados a 21 de Dezembro.
A escotilha de acesso ao exterior da estação espacial internacional foi despressurizada às 1149UTC e posteriormente aberta às 1152UTC. Após abandonarem o módulo Quest, os dois homens dirigiram-se para a ESP-3 (External Stowage Platform-3) e removeram o módulo sobressalente Pump Module 0006. Segurando o módulo, Hopkins foi depois deslocado utilizando o sistema de manipulação remota da ISS (Canadarm2) para o S1 Truss, com o módulo a ser instalado às 1456UTC e fixado na sua posição às 1508UTC. Posteriormente, as condutas de fluxo de amoníaco foram ligadas, bem como as ligações eléctricas.
Os dois homens regressaram ao módulo Quest após um processo de descontaminação devido à ocorrência de uma fuga de amoníaco quando uma das condutas se recusou a separar-se da posição anterior. A escotilha foi fechada às 1904UTC e o processo de pressurização decorreu entre as 1923UTC e as 1954UTC.